国产精品无码一区二区在线看-国产精品无码永久免费888-国产精品无码永久免费不卡-国产精品无码制服丝袜-国产精品无码专区-国产精品无码专区av在线播放

您好!歡迎訪問上海滬崢生物科技有限公司網(wǎng)站!
咨詢熱線

15001863771

當(dāng)前位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 用于RNAi的慢病毒包裝簡要程序

用于RNAi的慢病毒包裝簡要程序

更新時(shí)間:2020-03-18      點(diǎn)擊次數(shù):3060

慢病毒包裝簡要程序:
以六孔板中的1孔為例,每個(gè)樣品需要1×10∧6個(gè)293FT細(xì)胞。
1、取1.5ml滅菌EP管,加入1.5μg包裝混合質(zhì)粒和0.5μg表達(dá)質(zhì)粒以及250μl的無血清Opti MEM。輕柔混勻,室溫孵育5min。
2、取1.5ml滅菌EP管,取9μl 脂質(zhì)體2000l溶于250μl無血清Opti-MEM I培養(yǎng)基中。輕柔混勻,室溫孵育5min。
3、將DNA溶液和脂質(zhì)體溶液輕柔混勻。室溫孵育20min
4、用胰酶消化并記數(shù)293FT細(xì)胞。用含血清的DMEM培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。
5、在六孔板中每孔,加入1ml含血清的生長培養(yǎng)基,再加入DNA-脂質(zhì)體復(fù)合物。
6、將1ml重懸的293FT細(xì)胞(1×10∧6個(gè)細(xì)胞/ml)加入到平板中。37℃CO2孵箱中孵育過夜。
7、移除含有DNA-脂質(zhì)體復(fù)合物的培養(yǎng)基移除,代之以DMEM(含丙酮酸鈉和非必須氨基酸)。
7、轉(zhuǎn)染后48-72h收獲含病毒的上清。3000 rpm 離心20min,去除沉淀。
8、病毒上清-80°C貯存。
包裝出來的慢病毒對NIH/3T3細(xì)胞達(dá)90%以上感染效率

掃一掃,關(guān)注微信
地址:上海市,浦東新區(qū),懿行路(微信和手機(jī)號同號) 傳真:86-021-68969289
©2025 上海滬崢生物科技有限公司 版權(quán)所有 All Rights Reserved.  備案號:滬ICP備16008355號-1
主站蜘蛛池模板: 无码人妻精品一区二区三区夜夜嗨 | 无遮挡又黄又刺激的视频 | 午夜在线看片 | 国产福利视频一区 | 欧洲人免费视频网站在线 | 色综合67194 色综合888 | 成人免费观看视频久爱网 | 免费人成激情视频在线观看冫 | 色综合亚洲综合网站综合色 | 久久99久久99精品中文字幕 | 日韩欧美不卡 | 99国产精品无码 | 久久中文字幕网站篠田优 | 无码av免费一区二区三区 | 国产肉体ⅹxxx137大胆 | 日本一区二区三区免费a片 日本一区二区三区免费播放 | 免费a在线观看 | 日韩大片免费看 | 国产91在线免费 | 精品在线一区二区 | 成人日韩在线 | 亚洲女女女同性video | 日韩欧美一二三区 | 欧美日韩精品一区二区在线线 | 国产小视频免费观看 | 国产精品国产三级国av在线观看 | 99视频在线免费 | 可以直接免费观看的av网站 | 国产日本欧美在线观看 | 欧美爽爽爽爽爽爽视频 | 污污短视频 | 国产日本欧美在线观看 | 葫芦娃短视频下载 | 久久草在线视频国产一 | 国产精品成人av片免费看 | 欧美老妇大p毛茸茸 | 天天干成人网 | 国产精品人妻久久久999 | 国产亚洲欧美日韩在线观看一区二区 | 亚瑟天堂久久一区二区影院 | 九九热视 |